一.样 品 提 取
取2g果蔬样品(块茎类取4g),剪成1cm左右见方碎片,放入小烧杯(或取样瓶)中;然后加入10ml的缓冲液,振荡1-2分钟,静置2分钟待测。
二.试 剂 配 制
缓冲液:取1包缓冲剂,加入500ml的纯净水,搅拌溶解制成磷酸缓冲液,常温保存。
显色剂:取1瓶显色剂,加25ml磷酸缓冲液溶解,使用时取100µl ,4℃冰箱保存。
底 物:取1瓶底物,加12.5ml纯净水或蒸馏水溶解,使用时取100µl,4℃冰箱保存。
胆碱酯酶:无需配制,可直接使用,4℃冰箱保存。
三.测试结果的判读
1. 若样品的抑制率<50.0%时,说明样品中农药毒性小,样品合格。
2. 若样品的抑制率≧50.0%时,说明样品中农药毒性大,应复检,复检的结果若≧50.0%时,样品不合格。
3. 进行复检测试时,最好用同一待测液测定,因为同一待测品的不同部位农药含量不同。
四. 测 试
对照测试:于其中一个专用反应瓶中,加入2.5ml缓冲液,再分别加入100µl显色剂和酶液,混匀,静置预反应10分钟,后加入100µl底物,摇匀并立即倒入比色杯中,放入测试通道,按仪器《B》键测试1分钟。
样品测试:于其它专用反应瓶中,加入2.5ml待测样品液,再分别加入100µl显色剂和酶液,混匀,静置预反应10分钟,后加入100µl底物,摇匀并立即倒入比色杯中,放入测试通道,按仪器《M》键测试1分钟,后读数并作记录。